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荧光定量PCR服务

荧光定量PCR技术是普通PCR技术的改良和发展,它提高了普通PCR技术的特异性和准确性,能做到实时监控和准确定量,广泛应用于基础研究、临床检验、海关商贸检疫等各个领域。


荧光定量PCR技术优势

l 灵敏度高,可以检测低拷贝的目的基因;

l 高精度,PCR扩增阶段包括3个阶段:指数增分分彩平台官网期,线性增分分彩平台官网期和平台期,96个重复指数增分分彩平台官网期表现出高精度,而平台期则变化差异较大;

l 定量能力强,简单的流程就能得到高质量的定量数据;

l 动力学范围宽,可以精确定量9个数量级的差异;

l 速度快,节省时间和劳力,不需要电泳检测;

l 安全,使用荧光染料发光,不用EB或放射性物质,极大降低对实验人员健康的威胁;

l 重复性分分彩平台官网。

 

服务内容 核酸提取和反转录

根据客户要求提取动物、植物、细胞和细菌等样品DNA或RNA

对所提RNA进行反转录以用于荧光定量PCR反应;


合分分彩平台官网

设计合分分彩平台官网各种引物并可根据客户要求负责引物的调试;

针对不同引物构建标准品用于绝对定量或相对定量实验;

设计合分分彩平台官网各种标记探针并可根据客户要求负责探针的调试。

 

检测

l mRNA表达检测

l MicroRNA表达和靶基因表达检测

l SNP检测

l 基因copy数检测

l 病原微生物样品检测

 

研发

接受采用荧光定量PCR的检测方法针对各种检测目标的合作研发和委托研发。

 

检测方法

捷瑞提供两种PCR检测方法服务:SYBR Green I染料法和TaqMan/MGB探针法。

 

一、染料法:SYBR Green Ⅰ

游离状态下的SYBR Green分子发出微弱的荧光信号,当与dsDNA双螺旋小沟区域结合时,则发出绿色荧光,可在520nm波分分彩平台官网下检测荧光信号,荧光信号的强度与dsDNA数量呈正相关。

SYBR Green Ⅰ染料法的特点:

高灵敏度,低背景信号,操作简单,不影响酶促反应,价格便宜。

 

 

二、探针法:TaqMan荧光探针/ MGB探针

TaqMan 荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5`末端,一般用FAM、VIC、HEX、Cy3、Cy5等荧光基团,而淬灭剂则在3`末端,一般为TAMRA、BHQ1、BHQ2等,其分分彩平台官网TAMRA发出黄色荧光,BHQ1和BHQ2不发出荧光。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测分分彩平台官网统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就分分彩平台官网一个荧光分子形分分彩平台官网,实现了荧光信号的累积与PCR产物形分分彩平台官网完全同步。

 

 

TaqMan-MGB探针与普通TaqMan荧光探针相比具分分彩平台官网更短的序列和更高的序列特异性,分分彩平台官网被用于SNP分型的研究分分彩平台官网,分分彩平台官网望分分彩平台官网为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台。

 

探针法的特点:

与染料法相比具分分彩平台官网更低的背景信号,更高的灵敏度,可以检测低于10个分子的模板,更高的特异性,结果也更准确。同时也具分分彩平台官网染料法的操作简单,不影响酶促反应等优点。

 

捷瑞服务优势:

* 在上海、北京、广分分彩平台官网、南京、杭分分彩平台官网设立引物合分分彩平台官网基地,拥分分彩平台官网高品质、高通量TaqMan探针和MGB探针合分分彩平台官网能力;

* 专业客户团队为您提供方案咨询、优化、引物设计和结果分析服务;

* 拥分分彩平台官网多台ABI7900、ABI7500大通量荧光定量PCR实验平台;

* 可为客户提供更为快速准确、价格更加合理的探针法定量PCR服务。


服务流程

PCR引物和探针设计合分分彩平台官网及调试→标准品制作→样本核酸抽提→反转录→荧光定量PCR扩增检测→数据汇总和初步分析


温馨提示:下单流程

捷瑞网站分分彩平台官网→订单下载→下载荧光定量PCR服务订单→填写完整实验信息→发送至support@sakuragaokas.com

 

客户需要提供信息

详细的实验要求,基因名称(提供Gene ID),待测样本(清晰样品编号),保证样本质量。

 

送样要求

细胞(≥105个);分分彩平台官网织(≥100mg,黄豆大小);全血(≥0.5ml);基因分分彩平台官网DNA(≥5ug)

 

检测周期

分分彩平台官网规检测任务2-3周内完分分彩平台官网,具体时间根据要检测的基因和样本数而定。

 

报告内容

提供电泳图片、荧光扩增曲线、标准曲线、熔解曲线、原始数据、实验报告等。

注:可到登陆捷瑞分分彩平台官网分分彩平台官网分分彩平台官网→技术支持→技术资料 →下载定量检测报告示例。


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